000241

антителами, затем проводят конъюгацию с флуорофорами для последующей

визуализации

комплекса

антиген-моноклональное

антитело.

осуществляют гибридизацию

in situ

с ДНК-зондами. Для выявления

моноклональных антител и ДНК-зондов используют флуорофоры,

различающиеся по цвету. Изучение препарата под флуоресцентным

микроскопом при наличии необходимого набора фильтров позволяет

одновременно проводить анализ иммунофенотипа и гибридизационных

сигналов в интерфазных ядрах.

Из выше изложенного можно сделать вывод, что

FISH

метод позволяет

провести наиболее полный анализ кариотипа (определение нарушений набора

хромосом, диагностика транслокаций, делеций, дупликаций, инверсий и

инсерций). Методика

FISH

с использованием локус-специфических ДНК-

зондов (

LSI

) идеально подходит для детекции конкретных хромосомных

аберраций, имеющих диагностическое и прогностическое значение.

Трансмиссионная электронная микроскопия

(ТЭМ) – метод

морфологического исследования объектов с помощью потока электронов,

позволяющих изучить структуру этих объектов на макромолекулярном и

субклеточном уровнях.

ТЭМ требует специальной подготовки объектов изучения, однако

непременным

условием

для

любых

электронно-микроскопических

исследований является фиксация тканей. Для исследования берут биопсийный

материал или материал от трупа вскоре после наступления смерти.

Наибольшее распространение получила фиксация материала в глутаровом

альдегиде с последующей дофиксацией в четырехокиси осмия.

После фиксации необходимо осуществить обезвоживание ткани.

Следующим важным этапом подготовки материала для ЭМ является заливка

(заключение) тканей в заливочные среды с целью получения блока,

позволяющим приготовить тонкий срез ткани (толщиной не менее 100 нм),