17 / 54
15
лекулы, рецепторный аппарат клетки, гормоны, ферменты, иммуно-
глобулины и другие, что позволяет получить информацию о функ-
циональном состоянии клетки, ее взаимодействии с микроокружени-
ем, определить фенотип клетки, установить принадлежность клетки к
определенной ткани, оценить дифференцировку клеток. Все это име-
ет решающее значение в диагностике патологических процессов и, в
особенности, опухолей.
Приготовление ткани для ИГХ, как правило, не отличается от ру-
тинных методов. Однако после получения среза ткани необходимо
проведение ряда этапов, главными из которых являются инкубация
среза с антителами и детекция (визуализация) прикрепленных анти-
тел в световом микроскопе с использованием специальных веществ
(хромогенов).
В настоящее время использование гибридомной технологии по-
зволило производить огромное количество моноклональных анти-
тел (МКА), которые можно разделить на ряд групп : МКА для вы-
явления цитоспецифических антигенов, МКА для выявления антиге-
нов, характеризующих степень дифференцировки клеток, МКА для
выявления антигенов, характеризующих темп роста и прогноз опухо-
ли. В качестве примера можно привести МКА для различных типов
лимфоцитов :
CD
3 (зрелые
Т
-клетки),
CD
4 (
Т
-хелперы-индукторы),
CD
5 (
Т
-клетки),
CD
20 (большинство
В
-клеток),
CD
24 (молодые фор-
мы
В
-клеток),
CD
75 (
В
-клетки при размножении в центре фолликула),
PC
-1 (плазматические клетки).
Молекулярно-цитогенетические методы
.
В последние годы раз-
работан принципиально новый метод изучения хромосом – метод
FISH
(
fluorescent in situ hybridization
). Суть метода заключается в под-
готовке так называемого ДНК-зонда, который представляет собой од-
нонитевой участок ДНК, к которому присоединяется биотин.
На микроскопическом препарате
in situ
при обработке щёлочью
хромосомная ДНК денатурируется (разрываются связи между двумя
нитями ДНК). Зондом обрабатывают препарат. Поскольку последова-
тельность оснований ДНК-зонда и соответствующий участок хромо-
сомы взаимно комплементарны, зонд присоединяется именно к этой