000254

хромосоме или к конкретному участку хромосомы. В этом участке

происходит ренатурация (восстановление) ДНК. Это явление носит

название «гибридизация». После этого препарат обрабатывают ве-

ществом, которое способно избирательно присоединяться к биотину.

К этому веществу присоединен флуоресцентный краситель родамин

(красный цвет) или флуоресцеина изотиоцианат (зеленый цвет). С по-

мощью люминесцентного микроскопа окрашенные хромосомы мож-

но увидеть на фоне неокрашенных.

В настоящее время предложено использовать комбинацию мето-

дов иммунофенотипирования и

FISH

. Для этого анализа использу-

ют неокрашенные мазки крови, костного мозга или препараты дру-

гих тканей. На первом этапе препараты инкубируют со специфиче-

скими моноклональными антителами, затем проводят конъюгацию с

флуорофорами для последующей визуализации комплекса антиген-

моноклональное антитело. Далее осуществляют гибридизацию

in situ

с ДНК-зондами. Для выявления моноклональных антител и

ДНК-зондов используют флуорофоры, различающиеся по цвету.

Изучение препарата под флуоресцентным микроскопом при наличии

необходимого набора фильтров позволяет одновременно проводить

анализ иммунофенотипа и гибридизационных сигналов в интерфаз-

ных ядрах.

Из вышеизложенного можно сделать вывод, что

FISH

-метод позво-

ляет провести наиболее полный анализ кариотипа (определение на-

рушений набора хромосом, диагностика транслокаций, делеций, ду-

пликаций, инверсий и инсерций). Методика

FISH

с использованием

локус-специфических ДНК-зондов (

LSI

) идеально подходит для де-

текции конкретных хромосомных аберраций, имеющих диагностиче-

ское и прогностическое значение.

Принципы морфологической диагностики лимфом

Диагностика любых вариантов лимфом всегда начинается с рутин-

ных гистологических методов. Поэтому важно уже при окраске пре-

паратов гематоксилином и эозином предположить или диагностиро-