19 / 34
17
Работа 5.
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
КОНЦЕНТРАЦИИ ХОЛЕСТЕРИНА
В СОСТАВЕ α-ЛИПОПРОТЕИНОВ СЫВОРОТКИ КРОВИ
Липопротеины высокой плотности (α-липопротеины) об‑
разуются в печени в виде «незрелых липопротеинов» – пред‑
шественников липопротеинов высокой плотности, кото‑
рые имеют дисковидную форму, небольшой размер, состо‑
ят из белков и фосфолипидов. Предшественники липопроте‑
инов высокой плотности практически не содержат холесте‑
рола и триацилглицеридов, в крови они обогащаются холе‑
стеролом, получая его из мембран клеток различных тканей
и транспортируют холестерол в клетки печени («обратный
транспорт холестерола»), где он используется для синтеза
желчных кислот. В связи с тем, что α-липопротеины способ‑
ствуют выведению излишков холестерина из тканей (прежде
всего из сосудистой стенки) они получили название антиа‑
терогенных. Снижение концентрации холестерола в соста‑
ве липопротеинов высокой плотности до уровня 0.9 ммоль/л
вызывает повышенный риск развития атеросклероза.
Принцип метода.
Хиломикроны, липопротеины очень
низкой плотности и липопротеины низкой плотности, содер‑
жащиеся в исследуемой сыворотке крови, осаждаются при
добавлении фосфорновольфрамовой кислоты в присутствии
ионов магния. После центрифугирования в исследуемом об‑
разце остаются только липопротеины высокой плотности,
концентрация холестерола в которых определяется также
как концентрация общего холестерола.
Реактивы и материалы
Оборудование
1. Сыворотка крови
1. Штатив с пробирками № 1;
Штатив с пробирками № 2
2.Осаждающий реагент, содержащий
– фосфорновольфрамовую кислоту
0,55 ммоль/л
– магния хлорид 25 ммоль/л
2. Центрифуга