000478

Принцип метода

. Триацилглицеролы омыляются ги‑

дроксидом калия с образованием солей высших карбоновых

кислот и глицерина. При окислении глицерина образуется

формальдегид. Формальдегид реагирует с метилацетоном

и ионами аммония с образованием 3,5‑диацетил‑1,4‑ди-

гидролутидина желтого цвета.

Реактивы и материалы

Оборудование

1. Сыворотка крови

1. Штатив с пробирками

2. Стандартный раствор: триолеин

3,39 ммоль/л в изо-пропиловом спирте

2. Пипетки на 0,1; 1; 2; 5 мл.

3. Ацетилацетон: 0,75 г/л в растворе

20% изо-пропилового спирта

3. Мерная ложечка для 0,4 г ад‑

сорбента

4. Окислительный раствор: KJO

5,6

ммоль/л в ацетатном буфере

4. Водяная баня (60

С)

5. Калий гидроксид – раствор 1 моль/л 5. Центрифуга (3000 об/мин)

6. Изо-пропиловый спирт

6. Фотоэлектроколориметр, фио-

летовый светофильтр (425 нм),

кювета 1 см.

7. Адсорбент

Ход работы

1. В опытную пробирку прилить 0,1 мл сыворотки крови,

в стандартную – 0,1 мл стандартного раствора, а в контроль‑

ную – 0,1 мл дистиллированной воды.

2. Во все три пробирки добавить по 4 мл изо-пропилового

спирта.

3. Мерной ложечкой во все пробирки добавить по 0,4 г

адсорбента (3 ложечки)

4. Содержимое пробирок перемешать и встряхивать в те‑

чение 10–15 минут на встряхивателе.

5. Центрифугировать пробирки 5 минут при 3000 об/мин.

6. В сухие чистые пробирки перенести по 2 мл надоса‑

дочной жидкости опытной пробы, стандарта и контрольно‑

го раствора.

7. Во все три пробирки добавить по 0,5 мл раствора ги‑

дроксида калия, содержимое перемешать, пробирки закрыть