000506

Количество активных В‑лимфоцитов (CD19

/23

) в крови.

Пока‑

затель характеризует активность гуморального иммунного ответа

на антигены. Увеличение активных В‑лимфоцитов в периферической

крови свидетельствует о развитии аллергического или атопического

воспалительного процесса. Также этот маркер используется в уста‑

новлении варианта лимфопролиферативного заболевания.

Количество клеток

разных субпопуляций может определяться

различными методами: проточной цитофлюориметрией, иммуноги‑

сто- (цито)-химического, иммунофлюоресцентного исследования, ро‑

зеткообразования.

Проточная цитофлюориметрия:

при проведении исследования клет-

ки, окрашенные теми или иными флюоресцирующими антителами

(анти-CD3, анти-CD4, анти-CD8, анти-CD19, анти-CD20, анти-

CD16, анти-CD80, анти-CD86 и др.), вводят с потоком буферного рас-

твора в вибрирующую проточную камеру с форсункой. В каждой ка-

пле жидкости, выходящей из форсунки, содержится одна клетка.

Источник света (чаще всего лазер) освещает отдельные клетки в про-

ходящей через световой пучок тонкой струе жидкости. Исходный све-

товой луч рассеивается клеткой. Это рассеяние измеряется с помощью

фотоэлектронного умножителя (ФЭУ). Рассеяние света под малыми

углами (переднее рассеяние – forward scatter) может быть использовано

для определения размеров клетки. На основе данного параметра мож-

но отличить жизнеспособные ядерные клетки от мертвых и эритро-

цитов. Рассеяние света под углом 90° (боковое рассеяние – side scatter)

позволяет судить о соотношении размеров ядра и цитоплазмы и нали-

чии гранул в клетке. Полученные характеристики позволяют разделить

анализируемые лейкоциты на лимфоциты, моноциты, нейтрофилы.

Одновременно можно проводить анализ поверхностных и внутрикле-

точных антигенов клеток с помощью моноклональных антител к ним,

конъюгированных с различными флуоресцентными метками. Если ана-

лизируемая клетка содержит флюрохром, то он испускает излучение

соответствующих параметров, при этом интенсивность флуоресцен-

ции коррелирует с плотностью антигена на клеточной поверхности,

а уровень флуоресценции измеряется с помощью ФЭУ.

Функциональная активность

различных клеток иммунной си‑

стемы может быть охарактеризована по следующим параметрам:

• Способность к активации

‑,

‑лимфоцитов (

vitro

). Существу‑

ет антигенспецифическая (под влиянием определенных антигенов)