68

Ход работы 1. В одну центрифужную пробирку наливают 2 мл исследуемой сыворотки крови и 2 мл дистиллированной воды (опытная проба). 2. В другую центрифужную пробирку наливают 4 мл дистилли­ рованной воды (контрольная проба). Контрольная проба служит для учета кальция в реактивах. 3. В обе пробирки добавляют по 1 мл щавелевокислого аммония. Пробу встряхивают и оставляют на 30 мин при комнатной температуре. 4. Обе пробирки центрифугируют 10 мин при 3000 об/мин. 5. Из всех пробирок осторожно сливают надосадочную жидкость. Щавелевокислый кальций остается на дне в виде белого осадка. 6. Остаток щавелевокислого кальция отмывают от избытка ща­ велевокислого аммония. Для этого в пробирку наливают 4 мл рас­ твора аммиака. Пробу встряхивают и центрифугируют (3000 об/мин, 10 мин). Указанное отмывание можно повторить еще 2 раза. 7. В обе пробирки к осадку добавляют по 2 мл 1 н серной кислоты для растворения осадка щавелевокислого кальция. Осадки размеши­ вают стеклянными палочками и, не вынимая их, помещают пробирки в горячую (около 70°С) водяную баню (или в термостат) на 2 мин. 8. Оттитровывают смеси, перемешивая палочкой, 0,01 н раство­ ром перманганата калия до появления розового окрашивания, не ис­ чезающего в течение одной минуты. Пример расчета Количество общего кальция в сыворотке крови в мг% находят по формуле X = 0,2 х (А - Б) х 50, где А и Б - число X мл раствора перманганата калия, пошедшее на титрование опытной и контрольной проб, соответственно; числа 0,2 и 50 - коэффициенты. Для перевода мг% в моль/л полученный результат умножают на 0,249. Небелковые азотсодержащие вещества крови Работа 3. Количественное определение мочевины в плазме крови Мочевина образуется в результате обезвреживания аммиака в основном в печени.