68

Реактивы и материалы Оборудование 1. Сыворотка крови 1. Штатив с пробирками 2. Трихлоруксусная кислота (10% раствор) 2. Пипетки на 2,5,10 мл 3. Фосфорновольфрамовый реактив 3. Центрифуга 4. Углекислый натрий (10% раствор) 4. Микробюретка 5. Феррицианид калия (см. приложение) Ход работы 1. КЗ мл плазмы крови добавляют 3 мл 10%трихлоруксусной кис­ лоты (ТХУ), перемешивают и центрифугируют при 2000-3000 об/мин в течение 5-6 мин. 2. Надосадок переносят в колбу добавляют 2 мл фосфорноволь­ фрамового реактива и 10 мл 10%раствора углекислого натрия. Содер­ жимое колбы перемешивают. Появляется синее окрашивание, интен­ сивность которого пропорциональна количеству мочевой кислоты. 3. Из микробюретки осторожно, по каплям, титруют пробу рас­ твором феррицианида калия до полного исчезновения синего цвета. Пример расчета На титрование использовали 1,8 мл раствора феррицианида калия. 1,8x0,66x1000 ^ , Содержание мочевой кислоты: -------- --------- = 39,6 мг I л 39,6 : 168 = 0,235 ммоль/л, так как Mr мочевой кислоты = 168 Да. Безазотистые органические вещества Работа 5. Количественное определение глюкозы в плазме крови глюкозоксидазным методом Глюкоза (виноградный сахар) - один из основных энергетических субстратов организма. При окислении D-глюкозы кислородом воздуха под действием глюкозооксидазы образуется эквимолярное количество перекиси во­ дорода. Под действием пероксидазы перекись водорода окисляет хро­ могенные субстраты с образованием окрашенного продукта. Интен­ сивность окраски пропорциональна концентрации глюкозы в крови. 25