68

Ход работы 1. В центрифужную пробирку вносят ОДмл плазмы крови и 0,9 мл 3% раствора ТХУ. 2. Центрифугируют 10 мин при 3000 об/мин. 3. К 0,25 мл центрифугата добавляют 2,25 мл ортотолуидинового реактива и ставят на кипящую водяную баню на 8 мин. Охлаждают. 4. Фотометрируют с красным светофильтром. Расчет концентрации глюкозы в плазме крови выполняют с помо­ щью калибровочного графика. Работа 7. Количественное определение свободного и общего холестерина в сыворотке крови Холестерин - стероид, на основе которого образуются стероидные гормоны, желчные кислоты, холекальциферол (витамин /),). Свобод­ ный холестерин входит в состав всех клеточных мембран. Синтез холестерина на «экспорт» происходит в печени. Повышение уровня холестерина в крови (гиперхолестеринемия) наблюдается при атеросклерозе, сахарном диабете и т.д. Снижение уровня холестерина (гипохолестеринемия) бывает при аддисоновой болезни, врожденных гемолитических анемиях, острых панкреатитах, инфекционных заболеваниях. Содержание общего холестерина в плазме крови составля­ ет 3,3-6,6 ммоль/л. Около 2/3 холестерина в крови представлено в форме эфиров холестерина и жирных кислот; около 1/3 - в форме свободного холестерина (1,2-2,6 ммоль/л). Реактивы и материалы Оборудование 1. Сыворотка крови 1. Штатив с пробирками 2. Реактив хлорного железа 2. Пипетки на ОД и 5 мл 3. Дистиллированная вода 3. Водяная баня (100°С) 4. Калибровочный график 4. ФЭК, кювета 0,5 см, зеленый свето­ фильтр 540 нм Ход работы 1. В опытную пробирку наливают 0,05 мл сыворотки крови, в кон­ трольную пробирку - 0,05 мл дистиллированной воды. 2. В обе пробирки добавляют по 3 мл хлорного реактива, переме­ шивают и оставляют на 20 мин при комнатной температуре. 27