68

Рекомендации к составлению протокола В выводах сопоставить величину полученного при исследовании индекса пероксидазы с нормальными значениями его и оценить ак­ тивность пероксидазы исследуемой крови. Работа 11. Определение активности каталазы крови (по Баху и Зубковой) Каталаза (Н20 2 : Н20 2-оксидоредуктаза; КФ 1.11.1.6) относится к классу оксидоредуктаз. Является гемопротеином. Широко распро­ странена в природе. Наиболее высокая концентрация и активность ка­ талазы - в печени и эритроцитах. Каталаза катализирует расщепление перекиси водорода (до воды и молекулярного кислорода) и тем самым препятствует накоплению ее в токсических для организма количествах. 2 Н 20 2 ка~ > 2НХ ) + 0 2. Принцип определения активности каталазы основан на измерении количества перекиси водорода, разрушенной ферментом при опреде­ ленных условиях за единицу времени. Количество разложившейся перекиси водорода определяется по разности между ее содержанием до протекания реакции (контрольная проба) и оставшейся после дей­ ствия каталазы (опытная проба) путем титрования перманганатом ка­ лия в кислой среде. 2КМп04+5Н20 2+ 3H2S04 -> K2S04+ 2MnS04+ 8Н20 + 5 0 ,. Активность фермента выражают каталазным числом и показате­ лем каталазы. Каталазным числом называют количество мг HjO^, которое раз­ лагается 1мкл крови. В норме оно варьирует от 10 до 20 ед. Величина этого показателя снижается при раке, анемии, туберкулезе. Реактивы и материалы Оборудование 1. Раствор крови (1:1000); 1 мл раствора содержит 1 мкл крови 1. Штатив с пробирками 2. Перекись водорода (ОДн раствор) 2. Пипетки на 1,2 и 5 мл 3. Серная кислота (10% раствор) 3. Бюретки 4. Перманганат калия (ОД н раствор) 4. Конические колбы 5. Вода дистиллированная 5. Водяная баня (100°С) 32