000112

В настоящее время хромосомы относительно легко исследуют в лимфоцитах периферической крови. Этапы цитогенетического анализа: ■ лейкоциты венозной крови помещают в специальную пита­ тельную среду, добавляя фитогемагглютинин, который стимулирует клетки к делению, и выдерживают 72 часа в термостате; ■ за несколько часов до конца инкубации в среду добавляют кол­ хицин, который разрушает микротрубочки веретена деления, прекра­ щая процесс митоза. Часть клеток прекратит деление на стадии мета­ фазы, когда хромосомы расположены в одной плоскости; ■ затем культуру помещают в гипотонический раствор, чтобы до­ биться лучшего разобщения хромосом; ■ препараты окрашивают ядерными красителями (в частности, ацетоорсеином), и рассматривают в световом микроскопе с иммерсией. Важным этапом цитогенетического анализа является окраска по­ лученных препаратов. Её проводят простыми (рутинными), диффе­ ренциальными и флюоресцентными методами. Простая окраска позволяет провести групповую идентификацию хромосом. Раньше это делали следующим образом: под микроскопом подсчиты- , - вали общее количество хромосом, фотографировали их, затем из фо­ тографии вырезали ножницами каждую хромосому и наклеивали на чистый лист бумаги в ряд, начиная от самой большой (первой) хромосомы и кончая самой маленькой (двадцать второй) и половой Y-хромосомой. Теперь подсчёт и идентификацию осуществляют компьютерные программы, специально разработанные для этого метода. Цитогенетики с целью унификации методов идентификации хро­ мосом на конференции в 1960 г. в Денвере (США) предложили клас­ сификацию хромосом человека, учитывающую величину хромосом и расположение центромер. Все хромосомы по форме были подразделе­ ны на метацентрические, субметацентрические и акроцентрические, и разбиты на 7 групп, обозначенных латинскими буквами А, В, С, D, Е, F и G. Каждая пара хромосом была наделена порядковым номером от 1 до 22 (аутосомы), 23-я пара - половые хромосомы - обозначены X и Y. А (I) 1-3-я пары. 1-я и 3-я - почти метацентрические, 2-я - крупная субметацентрическая; 99