000112

(краситель Гимзы). После предварительной инкубации в солевом рас­ творе хромосомы обрабатываются протеазой. В результате они при­ обретают сегментированный вид благодаря чередованию тёмно- и светлоокрашенных участков. Предполагается, что окрашенные сег­ менты - это гетерохроматиновые участки с повторяющимися после­ довательностями ДНК, а неокрашенные - эухроматиновые районы с кодирующими последовательностями ДНК. Значение методов дифференциальной окраски состоит в том, что они выявляют индивидуальные особенности хромосом и позволяют оценивать хромосомный полиморфизм у человека. FISH-диагностика (Fluorescence in situ hybridization) - цитогенетиче- , • ский метод выявления специфических последовательностей ДНК в хромосомах с использованием нуклеотидных зондов с флуоресцентной мет ­ кой. Используя разные зонды, получают серию изображений, которые вво­ дят в компьютер. Специальные программы сводят изображения, окрашивая каждое определённым цветом1. B результате получают одно многоцветное изображение. Затем по нему устанавливается наличие определённых после­ довательностей ДНК в клетке или на хромосоме. С недавних пор в сравнительной геномной гибридизации метафазную хро­ мосому, используемую в качестве тестера, пытаются заменить биологиче­ скими микрочипами. Для создания такого микрочипа на специальную поверх­ ность наносят клонированные последовательности ДНК, характеризующие самые разные хромосомные районы. Проведение конкурентной гибридизации нормальной и опухолевой ДНК и сравнение интенсивностей их сигналов по­ зволяет оценить количественные соотношения последовательностей ДНК в клетке. Перечисленные методы с успехом применяются как для решения принципиальных научных задач, так и для проведения клинической диагностики. Однако, к сожалению, их чувствительности не всегда хватает для решения некоторых проблем, связанных с врождёнными хромосомными патологиями. В реальной клинической диагностике почти всегда приходится отрабатывать индивидуальный вариант диа­ гностического метода для решения конкретной задачи. 1 Так как цвет изображения задаётся программой и может не соответствовать реальному цвету красителя (в ряде случаев вообще используют чёрно-белое изображение), такую окраску называют «псевдоцвет». 101