000112

Многие химические вещества можно выявлять в клетке путём специфического окрашивания. Например, жиры окрашивают краси­ телем суданом, а гликоген - кармином. Разработаны методы окраски в клетке ДНК, РНК, белков, углеводов, витаминов, неорганических веществ. Такой методический подход получил название цитохимия. Оказалось, что многие способы цитохимического окрашивания по­ зволяют судить о количестве того или иного вещества в клетке - чем интенсивнее окраска, тем больше концентрация. Так, например, мож­ но измерить количество ДНК в ядре клетки или активность фермен­ тов цитозоля. В современной научной и клинической практике широко приме­ няются методы иммуноцитохимии. Они основаны на способности молекул антител связываться со строго определёнными белками. Впервые антитела, связанные с флуоресцентными красителями, для окрашивания клеток применил Кунс в 1941 г. Этот метод позволяет выявлять белковые молекулы, даже если их количество в клетке не­ велико. На основе светового микроскопа были созданы разнообразные ме­ тоды изучения клетки. Метод тёмного поля основан на эффекте Тиндаля1, когда при бо­ ковом освещении мельчайшие (менее 0,2 мкм) частицы светятся от­ ражённым светом. ^ f Метод тёмного поля применяется для получения изображений про/ \ зрачных и потому не видимых при наблюдении в светлом поле объ­ ектов. Пучок лучей, освещающих объект, выходит из специального кон­ денсора в виде полого конуса и непосредственно в объектив не попадает. Изображение создаётся только светом, который рассеивается мелко­ структурными элементами объекта. В поле зрения микроскопа на тём­ ном фоне видны светлые изображения мелких деталей; у крупных деталей видны только светлые края, которые рассеивают освещающие их лучи. Кстати, данный метод позволяет изучать живые клетки, не прибегая к окрашиванию. Метод интерференционной микроскопии был предложен в 1932 г. А.А. Лебедевым. Он основан на том, что поток света разделяется на два пучка. Один из пучков проходит через объект, а затем соединяется 1 Из курсов химии и физики вспомните, где ещё применяется этот эффект. 12