000112

Рис. 4. Схема разделения компонентов клетки ультрацентрифугированием (по Я. Кольману, К.-Г. Рему с изменениями). Чистота полученных на каждом этапе фракций, как правило, недо­ статочна для исследований. Поэтому проводят центрифугирование в градиенте плотности. Для этого образец переносят в пробирку с раствором сахарозы (5-20%). Концентрация сахарозы увеличивается от поверхности ко дну пробирки, формируя градиент. Частицы при центрифугировании задерживаются в том слое раствора сахарозы, ко­ торый соответствует их удельному весу. Метод дифференциального центрифугирования позволил выде­ лить различные компоненты клетки, изучить их химический состав, функционирование в бесклеточной среде. С помощью этого метода были открыты лизосомы и пероксисомы; определена молекулярная масса многих внутриклеточных белков и их распределение в клетке. 2 . 5 . к у л ь т и в и р о в а н и е к л е т о к Ещё в XIX веке возникла мысль о том, что клетки при определён­ ных условиях могут существовать вне организма. Однако только во второй половине XX века удалось понять основные принципы куль­ тивирования клеток. 20