163

90 практически не образуют окрашенных продуктов. Они реагируют лишь после нагревания в течение 20 минут при температуре 60ºС, максимальное поглощение наблюдается при 380–390 нм, т. е. в дру- гой части спектра. Для определения оптической плотности используют фотометры (КФК-2, КФК-3), толщина рабочего слоя кюветы 5 мм. В качестве раствора сравнения используют рабочий раствор 0,1% хлорного железа. Содержание исследуемых компонентов определяют по формулам: Сжк=150 × Д385 × Р; Схст=110 × (Д480-0,07Д385) × Р, где Сжк – определяемая концентрация желчных кислот в ммоль/л; Схст – опреде- ляемая концентрация холестерина в ммоль/л: Д385 – величина оптической плот- ности при 385 нм; Д480 – величина оптической плотности при 480 нм; Р – разве- дение желчи. Для определения концентрации фосфолипидов (Сфл) используют прямой колориметрический тест, в состав реагентов входит фосфо- липаза, холиноксидаза, 4-аминотрипсин, пероксидаза. Метод основан на способности фосфолипидов желчи под действием фосфолипазы-Д гидролизоваться до холина и фосфатидиновой кислоты. Затем холин окисляется холиноксидазой до бетаина и перекиси водорода, кото- рая в присутствии пероксидазы реагирует с 4-аминоантипирином и производными фенола с образованием комплекса красного цвета. Пе- ред проведением анализа реагенты следует прогреть до температуры 37ºС. Температура должна быть стабильной в течение всего опреде- ления. Реагенты и желчь перемешивают, инкубируют 10 минут и из- меряют оптическую плотность. Оптическая плотность образующего- ся стабильного комплекса пропорциональна содержанию фосфолипи- дов в пробе. Холато-холестериновый коэффициент (ХХК) и фосфолипидо- холестериновый коэффициент (ФЛХК), являющиеся основными ин- дексами литогенности желчи, определяются по формулам: ХХК=Сжк/Схст; ФЛХК= Сфл/ Схст.