212

6 чения среза ткани необходимо проведение ряда этапов, главными из которых являются инкубация среза с антителами и детекция (визуа- лизация) прикрепленных антител в световом микроскопе с использо- ванием специальных веществ (хромогенов). В настоящее время использование гибридомной технологии по- зволило производить огромное количество моноклональных антител, которые можно разделить на ряд групп – моноклональные антитела для выявления цитоспецифических антигенов, моноклональные анти- тела для выявления антигенов, характеризующих степень дифферен- цировки клеток, моноклональные антитела для выявления антигенов, характеризующих темп роста и прогноз опухоли. В качестве приме- ра можно назвать моноклональные антитела для различных типов лимфоцитов – CD 3 (зрелые Т -клетки), CD 4 ( Т -хелперы-индукторы), CD 5 ( Т -клетки), CD 20 (большинство В -клеток), CD 24 (молодые фор- мы В -клеток), CD 75 ( В -клетки при размножении в центре фолликула), PC -1 (плазматические клетки). Молекулярно-цитогенетические методы. В последние годы раз- работан принципиально новый метод изучения хромосом – метод FISH (fluorescent in situ hybridization) , заключающийся в подготовке, так называемого, ДНК-зонда, представляющего однонитевой участок ДНК, к которому присоединяется биотин. На микроскопическом препарате in situ при обработке щелочью хромосомная ДНК денатурируется (разрываются связи между двумя нитями ДНК). Зондом обрабатывают препарат. Поскольку последова- тельность оснований ДНК-зонда и соответствующий участок хромо- сомы взаимно комплементарны, зонд присоединяется именно к этой хромосоме или к конкретному участку хромосомы. В этом участке происходит ренатурация (восстановление) ДНК. Это явление носит название «гибридизация». После этого препарат обрабатывают ве- ществом, которое способно избирательно присоединиться к биотину. К этому веществу присоединен флюоресцентный краситель (рода- мин, имеющий красный цвет или флюоресцеин изотиоцианат зеле- ного цвета). С помощью люминесцентного микроскопа окрашенные хромосомы можно увидеть на фоне неокрашенных. В настоящее время предложено использовать комбинацию мето- дов иммунофенотипирования и FISH -метода. Для этого анализа ис-