212

7 пользуют неокрашенные мазки крови, костного мозга или препараты других тканей. На первом этапе препараты инкубируют со специфи- ческими моноклональными антителами, затем проводят конъюгацию с флуорофорами для последующей визуализации комплекса анти- ген-моноклональное антитело. Далее осуществляют гибридизацию in situ с ДНК-зондами. Для выявления моноклональных антител и ДНК- зондов используют флуорофоры, различающиеся по цвету. Изучение препарата под флуоресцентным микроскопом при наличии необходи- мого набора фильтров позволяет одновременно проводить анализ им- мунофенотипа и гибридизационных сигналов в интерфазных ядрах. Из вышеизложенного можно сделать вывод, что FISH -метод по- зволяет провести наиболее полный анализ кариотипа (определение нарушений набора хромосом, диагностика транслокаций, делеций, дупликаций, инверсий и инсерций). Методика FISH с использовани- ем локус-специфических ДНК-зондов ( LSI ) идеально подходит для детекции конкретных хромосомных аберраций, имеющих диагности- ческое и прогностическое значение. Трансмиссионная электронная микроскопия – метод морфоло- гического исследования объектов с помощью потока электронов, по- зволяющих изучить структуру этих объектов на макромолекулярном и субклеточном уровнях. Трансмиссионная электронная микроскопия требует специальной подготовки объектов изучения, однако непременным условием для любых электронно-микроскопических исследований является фикса- ция тканей. Для исследования берут биопсийный материал или ма- териал от трупа вскоре после наступления смерти. Наибольшее рас- пространение получила фиксация материала в глутаровом альдегиде с последующей дофиксацией в четырехокиси осмия. После фиксации необходимо осуществить обезвоживание ткани. Следующим важным этапом подготовки материала для электронной микроскопии является заливка (заключение) тканей в заливочные среды с целью получения блока, позволяющим приготовить тонкий срез ткани (толщиной не менее 100 нм), через который может пройти электронный луч. Наиболее широко для заливки тканей используют эпоксидные смолы, в основном аралдит и эпон.