214

41 ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА Определение количества иммуноглобулинов в сыворотке крови мето- дом радиальной иммунодиффузии (по Манчини) Принцип метода основан на том, что в агаровом геле, содержащем специ- фическую антисыворотку, при внесении в нее исследуемой сыворотки, со- держащей иммуноглобулины, образуются кольца преципитации. Диаметр и площадь колец преципитации находятся в прямой зависимости от концен- трации исследуемого иммуноглобулина в сыворотке крови. За 2–3 дня до практического занятия готовят пластинки агарового геля с соответствующими антисыворотками. После застывания агарового геля в пластинках вырезают лунки диаметром 3–4 мм. В лунки вносят по капле исследуемой сыворотки и оставляют на 18–24 часа. За это время иммуно- глобулины диффундируют в агаровый гель, образуют со специфическими белками антисыворотки кольца преципитации. На занятии проводят измерение диаметров колец преципитации иссле­ дуемых сывороток. Циркулем измеряют диаметр каждого кольца преципи- тации в двух противоположных направлениях и вычисляют среднее значе- ние. Количество иммуноглобулинов вычисляют по калибровочной кривой, выражающей зависимость между уровнем иммуноглобулинов и диаметром колец преципитации. На оси абсцисс калибровочной кривой откладывают диаметр кольца преципитации, восстанавливают перпендикуляр до пересе- чения с калибровочной кривой. Точку пересечения проецируют на ось ор- динат, полученное значение соответствует количеству иммуноглобулинов (в мг/мл). Полученные результаты (кольца преципитации) зарисовывают, ко- личество иммуноглобулинов записывают в протокол исследования. Обсуждение результатов исследования ведут, ответив на следующие вопросы: 1. Каков механизм образования колец преципитации в агаровом геле при добавлении антигена? 2. Какие количественные изменения иммуноглобулинов выявлены при исследовании пластинок с агаровым гелем? 3. Определить вид, возможные механизмы гуморального иммунодефици- та в проведенных исследованиях. 4. Какие клинические проявления иммунодефицита можно предполо- жить по полученным результатам исследования? ТЕСТОВЫЕ ЗАДАНИЯ Выберите один или несколько правильных ответов. 1. К гуморальным иммунодефицитам относятся 1) синдром Ди Джорджи 2) ретикулярная дисгенезия 3) агаммаглобулинемия Брутона 4) синдром незавершенного фагоцитоза 5) дефицит Ig А