000241
антителами, затем проводят конъюгацию с флуорофорами для последующей визуализации комплекса антиген-моноклональное антитело. Далее осуществляют гибридизацию in situ с ДНК-зондами. Для выявления моноклональных антител и ДНК-зондов используют флуорофоры, различающиеся по цвету. Изучение препарата под флуоресцентным микроскопом при наличии необходимого набора фильтров позволяет одновременно проводить анализ иммунофенотипа и гибридизационных сигналов в интерфазных ядрах. Из выше изложенного можно сделать вывод, что FISH метод позволяет провести наиболее полный анализ кариотипа (определение нарушений набора хромосом, диагностика транслокаций, делеций, дупликаций, инверсий и инсерций). Методика FISH с использованием локус-специфических ДНК- зондов ( LSI ) идеально подходит для детекции конкретных хромосомных аберраций, имеющих диагностическое и прогностическое значение. Трансмиссионная электронная микроскопия (ТЭМ) – метод морфологического исследования объектов с помощью потока электронов, позволяющих изучить структуру этих объектов на макромолекулярном и субклеточном уровнях. ТЭМ требует специальной подготовки объектов изучения, однако непременным условием для любых электронно-микроскопических исследований является фиксация тканей. Для исследования берут биопсийный материал или материал от трупа вскоре после наступления смерти. Наибольшее распространение получила фиксация материала в глутаровом альдегиде с последующей дофиксацией в четырехокиси осмия. После фиксации необходимо осуществить обезвоживание ткани. Следующим важным этапом подготовки материала для ЭМ является заливка (заключение) тканей в заливочные среды с целью получения блока, позволяющим приготовить тонкий срез ткани (толщиной не менее 100 нм), 18
Made with FlippingBook
RkJQdWJsaXNoZXIy MzI5Njcy