000254
16 хромосоме или к конкретному участку хромосомы. В этом участке происходит ренатурация (восстановление) ДНК. Это явление носит название «гибридизация». После этого препарат обрабатывают ве- ществом, которое способно избирательно присоединяться к биотину. К этому веществу присоединен флуоресцентный краситель родамин (красный цвет) или флуоресцеина изотиоцианат (зеленый цвет). С по- мощью люминесцентного микроскопа окрашенные хромосомы мож- но увидеть на фоне неокрашенных. В настоящее время предложено использовать комбинацию мето- дов иммунофенотипирования и FISH . Для этого анализа использу- ют неокрашенные мазки крови, костного мозга или препараты дру- гих тканей. На первом этапе препараты инкубируют со специфиче- скими моноклональными антителами, затем проводят конъюгацию с флуорофорами для последующей визуализации комплекса антиген- моноклональное антитело. Далее осуществляют гибридизацию in situ с ДНК-зондами. Для выявления моноклональных антител и ДНК-зондов используют флуорофоры, различающиеся по цвету. Изучение препарата под флуоресцентным микроскопом при наличии необходимого набора фильтров позволяет одновременно проводить анализ иммунофенотипа и гибридизационных сигналов в интерфаз- ных ядрах. Из вышеизложенного можно сделать вывод, что FISH -метод позво- ляет провести наиболее полный анализ кариотипа (определение на- рушений набора хромосом, диагностика транслокаций, делеций, ду- пликаций, инверсий и инсерций). Методика FISH с использованием локус-специфических ДНК-зондов ( LSI ) идеально подходит для де- текции конкретных хромосомных аберраций, имеющих диагностиче- ское и прогностическое значение. Принципы морфологической диагностики лимфом Диагностика любых вариантов лимфом всегда начинается с рутин- ных гистологических методов. Поэтому важно уже при окраске пре- паратов гематоксилином и эозином предположить или диагностиро-
Made with FlippingBook
RkJQdWJsaXNoZXIy MzI5Njcy