000260

101 (краситель Гимзы). После предварительной инкубации в солевом рас- творе хромосомы обрабатываются протеазой. В результате они при- обретают сегментированный вид благодаря чередованию тёмно- и светлоокрашенных участков. Предполагается, что окрашенные сег- менты – это гетерохроматиновые участки с повторяющимися после- довательностями ДНК, а неокрашенные – эухроматиновые районы с кодирующими последовательностями ДНК. Значение методов дифференциальной окраски состоит в том, что они выявляют индивидуальные особенности хромосом и позволяют оценивать хромосомный полиморфизм у человека. FISН -диaгнocтикa (Fluorescence in situ hybridization) – цитогенетиче- ский метод выявления специфических последовательностей ДНК в хромосомах с использованием нуклеотидных зондов с флуоресцентной мет- кой. Используя разные зонды, получают серию изображений, которые вво- дят в компьютер. Специальные программы сводят изображения, oкpaшивaя каждое определённым цвeтом 1 . B peзультaтe пoлучaют oднo мнoгoцвeтнoe изoбpaжeниe. Затем по нему устанавливается наличие определённых после- довательностей ДНК в клетке или на хромосоме. С недавних пор в сравнительной геномной гибридизации метафазную хро- мосому, используемую в качестве тестера, пытаются заменить биологиче- скими микрочипами. Для создания такого микрочипа на специальную поверх- ность наносят клонированные последовательности ДНК, характеризующие самые разные хромосомные районы. Проведение конкурентной гибридизации нормальной и опухолевой ДНК и сравнение интенсивностей их сигналов по- зволяет оценить количественные соотношения последовательностей ДНК в клетке. Перечисленные методы с успехом применяются как для решения принципиальных научных задач, так и для проведения клинической диагностики. Однако, к сожалению, их чувствительности не всегда хватает для решения некоторых проблем, связанных с врождёнными хромосомными патологиями. В реальной клинической диагностике почти всегда приходится отрабатывать индивидуальный вариант диа- гностического метода для решения конкретной задачи. 1 Так как цвет изображения задаётся программой и может не соответствовать реальному цвету красителя (в ряде случаев вообще используют чёрно-белое изображение), такую окраску на- зывают «псевдоцвет».