000260

22 Долгое время не удавалось поставить культивирование клеток на стро- го научную основу, т.к. при изготовлении сред использовались биологические материалы – сыворотка крови, экстракт куриных эмбрионов, эмбриональ- ная сыворотка коровы и др. Состав этих компонентов сложен и не поддаёт- ся стандартизации. Только в 1965 г. Р. Дж. Хэм предложил бессывороточную среду строго определённого состава. Для получения культуры клеток из организма выделяют исход- ный материал – клетки, которые дадут начало первичной культуре . Предпочтительнее для этого брать клетки эмбриональных тканей, опухолевые клетки и мутантные клетки с нарушенным контролем клеточного деления. Перенося клетки из первичной культуры на све- жую культуральную среду, получают вторичные культуры . При ре- гулярных пересадках можно добиться сохранения культуры клеток в течение многих лет. Отдельные линии клеток способны расти в виде суспензии – в не- котором объёме культуральной среды 1 . Большинство же клеток может расти только на твёрдой основе – подложке. Первоначально в каче- стве подложки использовался сгусток плазмы крови. В современных методиках применяют контейнеры из обработанного особым образом стекла или специального пластика (рис. 5). Рис. 5. Сосуды для культивирования клеток : А – чашка Колле: плоский со- суд с клетками на дне; Б – вращающийся сосуд с клетками на дне и на стенках; В – проточная система с колонкой, содержащей клетки на специальном носите- ле (стеклянные шарики); Г – планшет для культивирования, клетки расположены на мембране вкладыша: 1 – вкладыш, 2 – лунка планшета, 3 – питательная среда (из http://www.biotechnolog.ru) . 1 Наиболее известная и распространённая линия эпителиальных клеток человека – HeLa – ши- роко применяется в биологических и медицинских исследованиях. Она способна расти и раз- множаться в суспензии.