000321

49 Помимо индуцированных патогенными факторами иммунодефицитов (патологических), принято выделять ряд физиологических состояний, ха‑ рактеризующихся пониженной иммунологической реактивностью, к кото‑ рым относятся: • ранний детский возраст, • беременность, • старческий возраст. Для диагностики иммунодефицитов применяют исследование иммунно‑ го статуса пациента. Иммунный статус оценивают с помощью физикальных и лабораторных методов (иммунограмма). Иммунограмма состоит из ряда тестов, которые выполняют в два этапа: • тесты I уровня – ориентировочные (общее количество лейкоцитов, лейко‑ цитарная формула и лейкоцитарный профиль, количество Т ‑ и В ‑лимфоцитов, концентрация  IgM , IgG , IgA в плазме крови, тест на фагоцитоз); • тесты II уровня – уточняющие (более углубленное исследование параме‑ тров иммунной системы). Назначаются избирательно после ориентировочно‑ го выявления дефекта в том или ином звене иммунитета. ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА Опыт 1. Определение количества иммуноглобулинов в сыворотке кро- ви методом радиальной иммунодиффузии (по Манчини) Принцип метода основан на том, что в агаровом геле, содержащем спец‑ ифическую антисыворотку, при внесении в неё исследуемой сыворотки, со‑ держащей иммуноглобулины, образуются кольца преципитации. Диаметр и площадь колец преципитации находятся в прямой зависимости от концен‑ трации исследуемого иммуноглобулина в сыворотке крови. За 2–3 дня до практического занятия готовят пластинки агарового геля с соответствующими антисыворотками. После застывания агарового геля в пластинках вырезают лунки диаметром 3–4 мм. В лунки вносят по капле исследуемой сыворотки и оставляют на 18–24 часа. За это время иммуногло‑ булины диффундируют в агаровый гель, образуют со специфическими бел‑ ками антисыворотки кольца преципитации. На занятии производят измерение диаметров колец преципитации ис‑ следуемых сывороток. Циркулем измеряют диаметр каждого кольца преци‑ питации в двух противоположных направлениях и вычисляют среднее зна‑ чение. Количество иммуноглобулинов вычисляют по калибровочной кри‑ вой, выражающей зависимость между уровнем иммуноглобулинов и диа‑ метром колец преципитации. На оси абсцисс калибровочной кривой откла‑ дывают диаметр кольца преципитации, восстанавливают перпендикуляр