441

99 В настоящее время хромосомы относительно легко исследуют в лимфоцитах периферической крови. Этапы цитогенетического анализа:  лейкоциты венозной крови помещают в специальную пита- тельную среду, добавляя фитогемагглютинин, который стимулирует клетки к делению, и выдерживают 72 часа в термостате;  за несколько часов до конца инкубации в среду добавляют кол- хицин, который разрушает микротрубочки веретена деления, прекра- щая процесс митоза. Часть клеток прекратит деление на стадии мета- фазы, когда хромосомы расположены в одной плоскости;  затем культуру помещают в гипотонический раствор, чтобы до- биться лучшего разобщения хромосом;  препараты окрашивают ядерными красителями (в частности, ацетоорсеином), и рассматривают в световом микроскопе с иммерсией. Важным этапом цитогенетического анализа является окраска по- лученных препаратов. Её проводят простыми (рутинными), диффе- ренциальными и флюоресцентными методами. Простая окраска позволяет провести групповую идентификацию хромосом. Раньше это делали следующим образом: под микроскопом подсчиты- вали общее количество хромосом, фотографировали их, затем из фо- тографии вырезали ножницами каждую хромосому и наклеивали на чистый лист бумаги в ряд, начиная от самой большой (первой) хромосомы и кончая самой маленькой (двадцать второй) и половой Y-хромосомой. Теперь подсчёт и идентификацию осуществляют компьютерные программы, специально разработанные для этого метода. Цитогенетики с целью унификации методов идентификации хро- мосом на конференции в 1960 г. в Денвере (США) предложили клас- сификацию хромосом человека, учитывающую величину хромосом и расположение центромер. Все хромосомы по форме были подразделе- ны на метацентрические, субметацентрические и акроцентрические, и разбиты на 7 групп, обозначенных латинскими буквами А , В , С , D , Е , F и G . Каждая пара хромосом была наделена порядковым номером от 1 до 22 (аутосомы), 23-я пара – половые хромосомы – обозначены X и Y . А (I) 1-3-я пары. 1-я и 3-я – почти метацентрические, 2-я – крупная субметацентрическая;