441

12 Многие химические вещества можно выявлять в клетке путём специфического окрашивания. Например, жиры окрашивают краси- телем суданом, а гликоген – кармином. Разработаны методы окраски в клетке ДНК, РНК, белков, углеводов, витаминов, неорганических веществ. Такой методический подход получил название цитохимия. Оказалось, что многие способы цитохимического окрашивания по- зволяют судить о количестве того или иного вещества в клетке – чем интенсивнее окраска, тем больше концентрация. Так, например, мож- но измерить количество ДНК в ядре клетки или активность фермен- тов цитозоля. В современной научной и клинической практике широко приме- няются методы иммуноцитохимии . Они основаны на способности молекул антител связываться со строго определёнными белками. Впервые антитела, связанные с флуоресцентными красителями, для окрашивания клеток применил Кунс в 1941 г. Этот метод позволяет выявлять белковые молекулы, даже если их количество в клетке не- велико. На основе светового микроскопа были созданы разнообразные ме- тоды изучения клетки. Метод тёмного поля основан на эффекте Тиндаля 1 , когда при бо- ковом освещении мельчайшие (менее 0,2 мкм) частицы светятся от- ражённым светом. Метод тёмного поля применяется для получения изображений про- зрачных и потому не видимых при наблюдении в светлом поле объек- тов. Пучок лучей, освещающих объект, выходит из специального конден- сора в виде полого конуса и непосредственно в объектив не попадает. Изо- бражение создаётся только светом, который рассеивается мелкострук- турными элементами объекта. В поле зрения микроскопа на тёмном фоне видны светлые изображения мелких деталей; у крупных деталей видны только светлые края, которые рассеивают освещающие их лучи. Кстати, данный метод позволяет изучать живые клетки, не прибегая к окрашиванию. Метод интерференционной микроскопии был предложен в 1932 г. А.А. Лебедевым. Он основан на том, что поток света разделяется на два пучка. Один из пучков проходит через объект, а затем соединяется 1 Из курсов химии и физики вспомните, где ещё применяется этот эффект.