441

20 Рис. 4. Схема разделения компонентов клетки ультрацентрифугированием (по Я. Кольману, К.-Г. Рему с изменениями). Чистота полученных на каждом этапе фракций, как правило, недо- статочна для исследований. Поэтому проводят центрифугирование в градиенте плотности . Для этого образец переносят в пробирку с раствором сахарозы (5–20%). Концентрация сахарозы увеличивается от поверхности ко дну пробирки, формируя градиент. Частицы при центрифугировании задерживаются в том слое раствора сахарозы, ко- торый соответствует их удельному весу. Метод дифференциального центрифугирования позволил выде- лить различные компоненты клетки, изучить их химический состав, функционирование в бесклеточной среде. С помощью этого метода были открыты лизосомы и пероксисомы; определена молекулярная масса многих внутриклеточных белков и их распределение в клетке. 2.5. КУЛЬТИВИРОВАНИЕ КЛЕТОК Ещё в XIX веке возникла мысль о том, что клетки при определён- ных условиях могут существовать вне организма. Однако только во второй половине XX века удалось понять основные принципы куль- тивирования клеток.