478

24 Принцип метода . Триацилглицеролы омыляются ги‑ дроксидом калия с образованием солей высших карбоновых кислот и глицерина. При окислении глицерина образуется формальдегид. Формальдегид реагирует с метилацетоном и ионами аммония с образованием 3,5‑диацетил‑1,4‑ди- гидролутидина желтого цвета. Реактивы и материалы Оборудование 1. Сыворотка крови 1. Штатив с пробирками 2. Стандартный раствор: триолеин 3,39 ммоль/л в изо-пропиловом спирте 2. Пипетки на 0,1; 1; 2; 5 мл. 3. Ацетилацетон: 0,75 г/л в растворе 20% изо-пропилового спирта 3. Мерная ложечка для 0,4 г ад‑ сорбента 4. Окислительный раствор: KJO 4 5,6 ммоль/л в ацетатном буфере 4. Водяная баня (60  о С) 5. Калий гидроксид – раствор 1 моль/л 5. Центрифуга (3000 об/мин) 6. Изо-пропиловый спирт 6. Фотоэлектроколориметр, фио- летовый светофильтр (425 нм), кювета 1 см. 7. Адсорбент Ход работы 1. В опытную пробирку прилить 0,1 мл сыворотки крови, в стандартную – 0,1 мл стандартного раствора, а в контроль‑ ную – 0,1 мл дистиллированной воды. 2. Во все три пробирки добавить по 4 мл изо-пропилового спирта. 3. Мерной ложечкой во все пробирки добавить по 0,4 г адсорбента (3 ложечки) 4. Содержимое пробирок перемешать и встряхивать в те‑ чение 10–15 минут на встряхивателе. 5. Центрифугировать пробирки 5 минут при 3000 об/мин. 6. В сухие чистые пробирки перенести по 2 мл надоса‑ дочной жидкости опытной пробы, стандарта и контрольно‑ го раствора. 7. Во все три пробирки добавить по 0,5 мл раствора ги‑ дроксида калия, содержимое перемешать, пробирки закрыть