506

16 Количество активных В‑лимфоцитов (CD19 + /23 + ) в крови. Пока‑ затель характеризует активность гуморального иммунного ответа на антигены. Увеличение активных В‑лимфоцитов в периферической крови свидетельствует о развитии аллергического или атопического воспалительного процесса. Также этот маркер используется в уста‑ новлении варианта лимфопролиферативного заболевания. Количество клеток разных субпопуляций может определяться различными методами: проточной цитофлюориметрией, иммуноги‑ сто- (цито)-химического, иммунофлюоресцентного исследования, ро‑ зеткообразования. Проточная цитофлюориметрия: при проведении исследования клет- ки, окрашенные теми или иными флюоресцирующими антителами (анти-CD3, анти-CD4, анти-CD8, анти-CD19, анти-CD20, анти- CD16, анти-CD80, анти-CD86 и др.), вводят с потоком буферного рас- твора в вибрирующую проточную камеру с форсункой. В каждой ка- пле жидкости, выходящей из форсунки, содержится одна клетка. Источник света (чаще всего лазер) освещает отдельные клетки в про- ходящей через световой пучок тонкой струе жидкости. Исходный све- товой луч рассеивается клеткой. Это рассеяние измеряется с помощью фотоэлектронного умножителя (ФЭУ). Рассеяние света под малыми углами (переднее рассеяние – forward scatter) может быть использовано для определения размеров клетки. На основе данного параметра мож- но отличить жизнеспособные ядерные клетки от мертвых и эритро- цитов. Рассеяние света под углом 90° (боковое рассеяние – side scatter) позволяет судить о соотношении размеров ядра и цитоплазмы и нали- чии гранул в клетке. Полученные характеристики позволяют разделить анализируемые лейкоциты на лимфоциты, моноциты, нейтрофилы. Одновременно можно проводить анализ поверхностных и внутрикле- точных антигенов клеток с помощью моноклональных антител к ним, конъюгированных с различными флуоресцентными метками. Если ана- лизируемая клетка содержит флюрохром, то он испускает излучение соответствующих параметров, при этом интенсивность флуоресцен- ции коррелирует с плотностью антигена на клеточной поверхности, а уровень флуоресценции измеряется с помощью ФЭУ. Функциональная активность различных клеток иммунной си‑ стемы может быть охарактеризована по следующим параметрам: • Способность к активации T ‑, B ‑лимфоцитов ( in vitro ). Существу‑ ет антигенспецифическая (под влиянием определенных антигенов)