506

19 определенные объемы рабочей суспензии меченых клеток-мишеней с РНК-азой и определенным объемом суспензии, содержащей моно- нуклеарные клетки (клетки-эффекторы). Культуры инкубируют 14 ч при 37 °C и с 5% содержанием СО 2. После инкубации содержимое лу- нок переносят на фильтры-собиратели клеток. Фильтры высушива- ют, помещают в сцинтилляционную жидкость, проводят учет реак- ции с помощью β-счетчика. Показатель функциональной активности естественных киллеров выражают в виде индекса цитотоксичности. • Чувствительность T ‑, B ‑, NK -лимфоцитов к апоптозу. Определение каспаз методом проточной цитофлуорометрии: в результате запуска апоптоза, опосредованного перфорин- гранзимовым и Fas/FasL механизмами, в клетке-мишени активиру- ются каспазы. Используя белки, содержащие меченные флуорофором участки, подверженные расщеплению каспазами, можно установить активность последних. Нерасщепленный флуорофор образует «мол- чащий» димер, после расщепления каспазами мономеры флуоресци- руют. Степень флюоресценции пропорциональна активности каспаз. Готовность T‑, B, NK-лимфоцитов к апоптозу может оценивать- ся по коэкспрессии клеткой линейно-дифференцировочных маркеров (например, CD3) и маркеров апоптоза (например, СD95, или Fas) с по- мощью проточной цитофлюориметрии. • Оценка функционирования Т‑лимфоцитов  in vivo . Принцип теста заключается во внутрикожном введении раство- ров различных вирусных, грибковых и бактериальных антигенов (кан- дида, трихофитон, протей, стрептококк, столбняк, дифтерия, ту- беркулин и др.), воздействию которых большинство людей когда-либо подвергалось, и к этим антигенам в нормальном организме должны были сформироваться клоны реагирующих Т‑лимфоцитов. Отрица- тельный результат теста с каким-либо антигеном свидетельствует о недостаточности иммунного ответа в отношении этого антигена. Определение содержания фракций иммуноглобулинов   (IgA, IgG, IgM, IgE) в сыворотке крови Характерным продуктом секреции В‑клеток на конечной стадии их дифференцировки, т. е. плазматических клеток, являются иммуно‑ глобулины. Концентрация иммуноглобулинов в сыворотке является результатом установившегося равновесия между их синтезом и рас‑ падом. Дефекты, связанные с нарушением метаболизма иммуногло‑