000667

22 4. Пробу охлаждают и центрифугируют 5 минут при 3000 об/мин. 5. К 1 мл надосадочной жидкости добавляют равный объем 10% раствора едкого натра и 2 капли раствора сернокислой меди. Появля- ется фиолетовое окрашивание, что доказывает белковую природу кол- лагена. Работа 9. КИСЛОТНЫЙ ГИДРОЛИЗ КОЛЛАГЕНА И ОПРЕДЕЛЕНИЕ В ГИДРОЛИЗАТЕ ГИДРОКСИПРОЛИНА 9.1. Кислотный гидролиз коллагена кожи Коллаген является основным компонентом соединительной ткани. Около 50% коллагена находится в скелетных тканях, 40% - в коже, 10% ‒ в строме внутренних органов. Основными особенностями аминокислотного состава коллагена является высокое содержание глицина (33%), гидроксипролина (14%), пролина (11%) практически не встречающееся в других белках, а так- же низкое содержание тирозина, цистеина и метионина, отсутствие триптофана. Реактивы и материалы Оборудование 1. Навеска кожи 1. Электрическая плитка 2. Дистиллированная вода 2. Асбестовая сетка 3. Соляная кислота концентриро- ванная 3. Колба с обратным холодиль- ником 4. Едкий натр (6Н раствор) 4. Воронка, фильтровальная бу- мага 5. Фенолфталеин 5. Мерный цилиндр 6. Весы с разновесами Ход работы: 1. Для получения гидролизата помещают 20 г кожи в колбу. 2. Добавляют 100 мл воды и 100 мл концентрированной соляной кислоты. 3. Кипятят содержимое колбы с обратным холодильником в течение 5-6 часов.